毛細管色譜柱的清潔需結合污染類型、固定相特性及操作規范,以下從多維度詳述其清潔流程與注意事項:
一、基礎清潔方法
- 溶劑沖洗法
- 適用場景:非極性或中等極性有機污染物(如油脂、殘留溶劑)。
- 操作要點:
- 溶劑選擇:優先使用甲醇、丙酮或正己烷,必要時可用二氯甲烷(含氯溶劑慎用)。
- 沖洗方式:通過微量注射器注入適量溶劑,依靠重力或低壓載氣推動溶劑流經色譜柱,重復多次直至污染物溶解排出。
- 禁忌:非鍵合/交聯固定相的色譜柱禁用此方法,以免固定相流失。
- 高溫老化法
- 適用場景:高沸點化合物(如聚合物、頑固殘留)。
- 操作要點:
- 溫度設定:低于色譜柱最高使用溫度10–20℃,持續2–8小時。
- 載氣流速:維持2–5 mL/min低流速,促進揮發物排出。
- 注意:老化后若基線仍不穩定,需結合其他方法進一步處理。
- 切割柱頭法
- 適用場景:物理性污染(如進樣口黑色沉積物)或其他方法無效時。
- 操作要點:切除污染嚴重的柱頭1–5 cm,切口需平整以避免影響柱效。
二、深度污染處理方案
- 蛋白質/生物樣品污染
- 清洗劑:0.1%三氟乙酸+20%異丙醇混合溶液。
- 步驟:低流速下沖洗,逐步過渡至高比例有機相。
- 緩沖鹽/金屬離子沉積
- 清洗劑:5%甲醇水溶液(禁用純水直接沖洗!)。
- 關鍵點:流速控制在0.3 mL/min以下,防止鹽析出加劇堵塞。
- 脂類/疏水性物質累積
- 清洗劑:四氫呋喃(THF)、氯仿等強溶劑,后續需置換回原體系。
三、操作規范與風險控制
- 拆卸與安裝:切斷氣源后依次卸下進樣口端螺母、密封圈及舊柱段,新柱安裝時需精確控制插入進樣口深度。
- 壓力監控:清洗過程中實時監測系統壓力,異常升高立即停泵排查在線過濾器狀態。
- 溶劑純度:務必使用色譜級試劑,避免引入新雜質。
毛細管色譜柱的清潔需遵循“對癥下藥”原則,結合物理清除、化學溶解及熱力學揮發等多種手段。日常預防性維護可大幅降低深度清洗頻率,而面對復雜污染時,建議建立《色譜柱使用檔案》,記錄每次清洗參數與性能變化,為精準維護提供數據支持。